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標題: 利用酵素連結免疫吸附法檢測及毛細管電泳確認牛乳中磺胺劑殘留之研究
Determination of Sulfa Drug Residues in Bovine Milk Using ELISA and Confirmed by Capillary Electrophoresis
作者: 柯文淑
KO, Wen-Shu
關鍵字: ELISA
磺胺劑
sulfa drugs
milk
ELISA
capillary electrophoresis
牛乳
毛細管電泳
出版社: 獸醫學系
摘要: 本研究的目的在利用酵素連結免疫吸附法檢測市售鮮乳及酪農場乳牛之生 乳中磺胺劑殘留之陽性率,並發展以毛細管電泳分析法相互驗證殘留之磺 胺劑.所使用商品化ELISA 試劑套組共有四種:(1)四價磺胺劑之酵素連結 免疫吸附試劑組.(2)單價磺胺二甲嘧啶之酵素連結免疫吸附試劑組.(3)單 價磺胺二甲氧嘧啶之酵素連結免疫吸附試劑組.(4)簡易型之單價磺胺二甲 嘧啶酵素連結免疫吸附試劑組.所使用的試劑組對磺胺劑不但可以做定性 分析,更可以經由判讀儀之判讀下作進一步定量的分析.檢測結果陽性之乳 樣本則再利用二氯甲烷萃取濃縮後,於毛細管電泳分析儀中配合光譜吸收 圖做種類之再確認.本研究在民國八十六年七月至八十七年四月間在台灣 北.中.南三區針對10種品牌,共購得266個市售鮮乳,做持續性之檢驗.另於 民國八十六年九月收集808個酪農場生乳樣本做磺胺劑殘留試驗.這些樣本 皆利用ELISA篩檢磺胺劑,首先用四價ELISA試劑套組篩得陽性樣本,在利用 單價ELISA 試劑套組進一步定性與定量.在市售鮮乳方面,磺胺劑之檢出陽 性率(超過0.001ppm)為69.5%(185/266),其中不合格率(超過0.01ppm) 占33.1%(88/266).陽性樣本之磺胺劑皆為磺胺二甲嘧啶,有的鮮乳殘留量 在0.1ppm以上.另在季節方面,市售鮮乳磺胺劑殘留的情形因季節不同,而 有顯著差異,夏季鮮乳磺胺劑殘留的不合格率(超過0.01ppm)53.6%遠高於 冬季鮮乳之24.7%.牛乳中磺胺劑毛細管電泳之確認方法,係重複三次10ml 二氯甲烷對5ml的牛乳進行磺胺劑之萃取,萃取液經蒸發濃縮後,再以甲醇 和CE所使用之緩衝液(1:1)共0.1ml定容成供試檢體.其萃取效果良好,四種 磺胺劑的平均回收率為73%.在CE分析儀中以波長240nm UV偵測器的檢測 下,能有效鑑別出六種磺胺劑其波峰下積分可做定量之依據. 酪農場生乳 中磺胺劑檢測方面.在808個生乳樣本中,僅有88個(10.9%)殘留量超過0.01 ppm.在陽性檢體中檢出含磺胺二甲嘧啶占92.05%(81/88),含磺胺二甲氧嘧 啶占7.95%(7/88),但有接近一半44.32%(39/88)的陽性生乳樣本的磺胺劑 殘留量超過0.1ppm,且最高濃度達1ppm.由本次研究可知,目前本省市售鮮 乳中磺胺劑的不合格率偏高,占33.1%(88/266).而酪農的生乳樣本不合格 率為10.9%(88/808).此現象可能是導因於少數酪農場磺胺劑濫用,以及未 能遵守停藥期所致.
Sulfa drug residues in market milk and raw milk were determined by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) and capillary electrophoresis (CE). ELISA kits could detect and quantitate sulfamethazine and sulfadimethoxine individually,
URI: http://hdl.handle.net/11455/12770
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