Please use this identifier to cite or link to this item: http://hdl.handle.net/11455/13625
標題: 雞住血原蟲性白冠病病媒生態與病原配殖體單源抗體之研製及定性
Ecological survey on the vector of avian leucocytozoonosis and the production of leucocytozoon caulleryi gametocyte monoclonal antibody
作者: 徐華山
XU, HUA-SHAN
關鍵字: 雞住血原蟲性百冠
病原配殖體
單源抗體
荒川庫蠓
氣象因子
雄性蠓有強烈的性
蔗糖梯度溶液純化
脾細胞NS-1骨隨廇
出版社: 獸醫研究所
摘要: 使用誘蚊燈在屏東縣三個蛋雞場定期誘捕荒川庫蠓,以每個月平均每盞次誘蚊燈捕獲 蠓數來描繪各場之季節消長,並與氣象因子作一比較。此種庫蠓在憐場之消長受氣溫 的影響最大,11月至2月平均氣溫在25℃以下時是其低谷期,3月至10月平均 氣溫在25℃到30℃之間則是高峰期。各場庫蠓密度之差異及高峰期間庫蠓密度之 變異則受雞場周圍環境的影響較深。8月綿密豐沛的雨量,使9月成為三場庫蠓出現 的共同高峰;11月到2月的稀少雨量,則使庫蠓密度進入低谷期,這兩種現象證明 降雨量對荒川庫蠓的消長有很大的影響。 以夜晚每一小時收集誘蚊燈捕獲之荒川庫蠓來推斷其夜晚活動的情形如下:18時至 翌日5時為其旺盛活動時段;其間19∼20時出現一個活動高峰,而22∼24時 之間達到整夜活動的最高峰。懷卵的庫蠓主要活動時段則是在18∼24時。在夜間 ,未吸血及已吸血蠓常棲息於雞舍內的各種物體上。雄性蠓則有強烈的性活動現象。 採取白冠病難血液,經過Ficoll-paque medium 及蔗糖梯度溶液純化Leucocytozoon caulleryi 之配殖體。以配殖體免疫Balb/c 小白鼠三次後, 取其脾細胞與NS-1骨髓 瘤細胞融合, 經HAT 培養液、ELISA 篩檢、極限稀釋之選殖,共得到25株分泌抗體 之單株化融合瘤。選取其中二株B5(IgG2a,K)、F1(IgG1,k )分別於培養瓶及Balb /c 小白鼠腹腔增殖以獲取含單源抗體之培養液及腹水。以 ProteinA-Sepharose C- L4B 親和性管柱純化的抗體, 經Western blotting assay的結果, B5對配殖體抗原11 6kd、75kd、62kd、54kd、42kd、34kd 等六個勝 產生反應; F1則對配殖體抗原166k d、150kd、116kd、75kd、62kd、54kd、45kd、34kd、18kd 等十個勝 產生反應; B5 及F1皆對裂殖體抗原 120kd、 75kd 兩個勝 產生反應。間接螢光抗體測定試驗, B5 及F1均對配殖體的胞膜產生螢光反應, 此與取自感染雞之多源抗體對整個配殖體有螢 光反應顯然不同。
URI: http://hdl.handle.net/11455/13625
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