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標題: 乳牛子宮特異蛋白特性之研究
Characterization of uterine specific protein of cows
作者: 鄭雅興
Zheng, Ya-Xing
關鍵字: VETERINARY
乳牛
ANIMAL-SCIENCE
子宮
特異蛋白特性
研究
獸醫
動物學
出版社: 獸醫研究所
摘要: 本實驗的目的在純化部分乳牛子宮特異蛋白,並作分子量,等電點及N 端胺基酸序 列分析等性質鑑定。以屠宰法逢機採集乳牛子宮液,並以14.1%native-PAGE,及 14.1%SDS-PAGE 和雙相電泳分析。 14.1% native gel 中,共得七條前白蛋白帶(Prealbumin)相對於白蛋白的距離 為RF=1.10,1.16,1.26,1.32,1.5 ,1.58,1.74。其中RF=1.26,1.32,1.5 三條前白蛋白帶出現頻率最高。以通電方式將膠體中RF=1.26,1.32,1.5,1.58 ,1.74五條前白蛋白帶萃取後,用西方墨點法測得分子量33.8及32kd蛋白帶會與兔 抗牛全血血清抗體作用,表非子宮特異蛋白。在雙相電泳分析下,除前述兩條蛋白 帶32/5.94-6.44及33.8/6.31-6.51外,尚有三點19/5.94,45/6.14, 45/6.09蛋白質因濃度低而無法判定是否為子宮特異蛋白。 14.1%SDS-PAGE 配合12.5%SDS 雙相電泳分析結困所得特異蛋白帶的分子量/等 電點分佈於14-38kd/>5.33。其中14kd/>7 的兩點蛋白質在西墨點法時不會與 兔抗牛全血清抗體作用,以膠體層析與通電方式將其中子宮液中純化出來,在雙相 電泳分析下為15kd/>7 略拖尾巴的淡染蛋白點。另一為14.2kd/>7 濃染均質的 蛋白點,經轉印至PVDF膜上作N 端胺基酸序列分析五個反應cycles後之胺基酸序列 為Val-Leu-Ser-Ala-與牛血紅素球蛋白alpha chain 前五個胺基酸序列相同, 疑為採樣時紅血球污染造成。而15kd/>7 的蛋白質前五段胺基酸序列分析結果則 表示此點應為子宮特異蛋白,因為電腦比對中尚無相同者。 #9306004 #9306004
URI: http://hdl.handle.net/11455/14142
顯示於類別:獸醫學系所

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