Please use this identifier to cite or link to this item: http://hdl.handle.net/11455/21046
標題: 六種台灣分離種魚腥藻藻膽色體之研究
作者: 劉淑瑛
LIU, SHU-YING
關鍵字: 分離種魚腥藻
藻膽色體
電泳SDS-PAGE分析
光譜分析
植物生態
出版社: 植物學研究所
摘要: 一、研究目的: 本研究的目的即是以六種台灣分離種魚腥藻(AnabaenaCH1,CH2,CH3,HA101,HA315,HA 401 )為材料,期離建立完整分離純化藻膽色體之方法,分析其光譜特性及每一種材 料內和藻膽色蛋白含量所佔比例,以及以電泳(SDS-PAGE)分析各藻膽色蛋白α,β subunits及linker peptides 的種類,數目及分子量大小,並以穿透式電子顯微鏡觀 察其完整結構,藉以比較它們與國外已發表報告之異同,期對台灣種藍綠藻藻膽色體 之特性有些許了解。 二、研究方法: 將魚腥藻細胞離心收集,於0.75M Na, K-Pi buffer ,在20,000psi 的壓力下,通過 French Press四次將細胞打破,然後加入10%(v/v )的Triton X-100,充分振盪20 分鐘後,以39,100 xg 的轉速離心30分鐘(20℃)。將溶有藻膽色體之buffer層吸出 ,加於蔗糖梯度最上層(蔗糖濃度分別為2M,1M,0.75M,0.5M及0.25M ),以107,000 xg的轉速離心20小時(20℃),那麼完整的藻膽色體便會集中在0.75M∼1M 蔗糖溶液 處。將此分離純化之完整藻膽色體,拿來測定其吸收光譜及螢光發光光譜,以陰染法 處理於穿透式電子顯微鏡下觀察照相,透析後,以SDS-PAGE分析其藻膽色蛋白組成。 三、研究結果: ⑴已確立完整分離純化台灣種藍綠藻藻膽色體之方法,如第二點研究方法裡所述。由 螢光發光光譜分析顯示所純化出之藻膽色體確仍保持完整結構。 ⑵由吸收光譜分析得知,六種魚腥藻之藻膽色蛋白均含有PC及APC ,但AnabaenaCH2 及HA315 尚含有PE。 ⑶六種魚腥藻中各藻膽色蛋白含量與葉綠素a 含量之比值如下: Anabaena 葉綠素a PC PE APC CH1 1 10 4.0 CH2 1 3.5 2.0 2.5 CH3 1 8.0 4.5 HA101 1 7.5 3.5 HA315 1 4.5 2.5 3.0 HA401 1 4.5 3.0 ⑷電泳分析顯示六種魚腥藻藻膽色體之α,β subunit的分子量都在14∼20kD之間; 且每種平均有4∼8條linker peptide的band,分子量在30∼110kD之間。 ⑸經穿透式電子顯微鏡觀察結果顯示,六種台灣分離種魚腥藻之藻膽色體結構與國外 發表的類似。
URI: http://hdl.handle.net/11455/21046
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