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標題: 立枯絲核菌(Rhizoctonia solani)第四融合群(AG-4)質體DNA之轉形與其致病性之
Plasmid transformation and the pathogenic expression of rhizoctonia solani AG-4
作者: 林佳霓
Lin, Jia-Ni
關鍵字: PLANT-SCIENCE
立枯絲核菌
BOTANY
Rhizoctonia solani
Anastomosis group
plasmid
transformation Pathogenic
第四融合群
質體DNA之轉形
致病性
植物科學
植物學
融合群
質體
轉形
出版社: 植物學研究所
摘要: 立枯絲核菌 (R.solani) 第四融合群 (AG-4) 中編號 CHU 341 菌株為一 具有線形質體 (pCHU 341) 的致病菌株,而另一編號 CHU 344 菌株,則為 不具有線形質體的弱致病菌株。本研究即以此二菌株為材料,建立其轉形 系統,得到穩定的轉形株,並進行致病性分析。實驗中,以質體 pUCH 1作為 轉形載體。另外,純化菌株 CHU 341 的質體 pCHU 341 DNA,利用酵素切割 出一段約為 2 Kb 左右的片段,將之黏接在質體 pUCH 1 上,構築出另一個 轉形載體 pUCH 1-ES。將 pUCH1及 pUCH 1-ES 此二轉形載體,經由聚二乙 醇 (PEG) 和氯化鈣 (CaCl2)的作用,分別送入 CHU 344 的原生質體中,並 以0.6M甘露醇 (Mannitol)來穩定原生質體內外滲透壓,再以含有抗生素 hygromycin B 的馬鈴薯洋菜培養基來篩選轉形後的再生菌株。最後,進行 菌株的致病性測試,以蘿蔔為寄主,偵測菌株 CHU 341, CHU 344 及轉形 株 CHU 344 + pUCH 1,CHU 344 + pUCH 1-ES 的致病情形,發現轉形株的 表現相似於原來的母株 CHU 344,並且轉形株 CHU 344+ pUCH 1, CHU 344 + pUCH1-ES 在致病性表現上, 亦無明顯差異,此結果顯示線形質體與 致病性之間,可能無直接之相關性。
URI: http://hdl.handle.net/11455/21677
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