Please use this identifier to cite or link to this item: http://hdl.handle.net/11455/52492
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dc.contributor.author謝快樂zh_TW
dc.contributor.other行政院國家科學委員會zh_TW
dc.contributor.other中興大學獸醫學系zh_TW
dc.date1994zh_TW
dc.date.accessioned2014-06-06T08:56:54Z-
dc.date.available2014-06-06T08:56:54Z-
dc.identifierNSC82-0409-B005-042zh_TW
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/11455/52492-
dc.description.abstract雞喉頭氣管炎(ILT)之活毒疫苗之使用可降低經 濟損失,而由於本病毒之latent infection或因stress或 疫苗減毒不良而發生爆發急性病例引起許多困擾 (2,8),以內核酸限制�對野外病例分離株與疫苗株 切割比較,證明野外病例可能由野外強毒株ぇ也 可能由疫苗毒(5,6)所引起,本實驗室前研究比較野 外分離毒與疫苗毒之內核酸限制�切割圖也發現 彼此間有相當差異存在(謝1991),利用此核酸片斷 間的差異作成區別野外強毒與疫苗弱毒之probe已 有報告き,本實驗室亦正進行此marker DNA之Cloning.本病毒屬alphaheropes virus subfamily其genome之長度達 150-190kbく其一些genes之sequences雖已被分析(3,4),但 完整的genome sequence仍無報告,株間sequence之比較亦 缺.本計畫擬對marker DNA片斷進行sequencing,從中選取核 酸序列最大相似區與最大相異區設定primer來嚐試 利用PCR診斷ILT病例及作區分強弱毒株之可能性探 討.本計畫擬取目前正選殖中的野外株經Hind □切割 所得之9.4kbp片斷及Pstl切割所得之6.7kbp片斷(二者 為與疫苗株明顯不同之片斷)及野外株與疫苗株 經Hind □切割所得之3.95共同相似之片斷,進行核 酸定序比較,擬採下列步驟依序進行.一,ILT片斷核酸定序:由前計畫所得上述重組質體 以Maniatis等之方法純化inserted DNA之質體,以適當限 制切割,電泳後利用Gene-clean(Bio-rad)分離純化上述 片斷,核酸定序方法則以M13定序盒及仿Sanger等方 法進行,先將DNA片斷接入M13mp18及M13mp19並轉形到 JM109 E. co:i,大量培養篩選含inserted DNA片斷陽性菌 落,並以純化噬菌體及抽取含inserted DNA片斷之 M13mp18 ssDNA及M13mp19ssDNA,再以M13定序引子及複製DNA 所需之dNTP(其中之一含32P標示者)進行核酸複製, 同時加入ddNTP,在不同位置上終止核酸複製反應, 電泳後之膠體經X光底片壓片沖洗後進行核酸序 列分析.zh_TW
dc.language.isozh_TWzh_TW
dc.relation.urihttp://grbsearch.stpi.narl.org.tw/GRB/result.jsp?id=4146&plan_no=NSC82-0409-B005-042&plan_year=82&projkey=PB8110-2045&target=plan&highStr=*&check=0&pnchDesc=%E5%8F%B0%E7%81%A3%E9%9B%9EILT%E4%B9%8B%E7%A0%94%E7%A9%B6-ILT+DNA%E7%89%87%E6%96%B7%E6%A0%B8%E9%85%B8%E5%AE%9A%E5%BA%8F%E5%8F%8A%E8%81%9A%E5%90%88%E8%84%A2%E9%80%A3%E9%8E%96%E5%8F%8D%E6%87%89%E5%BC%95%E5%AD%90%E4%B9%8B%E8%A8%AD%E5%AE%9Aen_US
dc.subject基礎研究zh_TW
dc.subjectInfectious laryngotracheitisen_US
dc.subject畜牧獸醫類, 生物技術zh_TW
dc.subject雞喉頭氣管炎zh_TW
dc.subject核酸探針zh_TW
dc.subject聚合?連鎖反應zh_TW
dc.subject南方轉印核酸雜交zh_TW
dc.subjectDNA probeen_US
dc.subjectPCRen_US
dc.subjectSouthern blot hybridizationen_US
dc.title台灣雞ILT之研究-ILT DNA片斷核酸定序及聚合脢連鎖反應引子之設定zh_TW
dc.titleStudies on ILT in Taiwan-Studies on DNA Sequencing and Establishment of PCR Primersen_US
dc.typeResearch Reportszh_TW
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