Please use this identifier to cite or link to this item: http://hdl.handle.net/11455/20796
標題: 十字花科軟腐病菌果膠分解酵素基因之選殖及表現
作者: 王英敏
WANG, YING-MIN
關鍵字: 十字花科;軟腐菌;果膠;果膠分解酵素;基因選殖;ERWINIA 腐;PECTATE-LYASE
出版社: 植物學研究所
摘要: 
細菌性軟腐病於作物栽培運輸及貯藏時期經常發生,造成嚴重損失。Erwinia 屬為主
要而常見的軟腐細菌,其寄主範圍非常廣泛,常由傷口或皮目等自然開口侵入寄主的
幼嫩組織或貯藏器官,Erwinia 屬會分泌cellulase, protease, pectate lyase為造
成病害之因。其中pectate lyase 會分解植物細胞中膠層(middle lamella)的果膠
物質為造成軟腐之主因,另外在工業應用上,pectate lyase 常用於果汁製造加工業
,在果汁製造過程中,常加pectate lyase 分解果膠,澄清果汁以利加上。為了進一
步了解防治Erwinia 屬造成的病害及工業上的應用,而對pectate lyase 分泌調解加
以分析研究。
本實驗的目的主要在於選殖Erwinia caratovora pv corotovora TG3的果膠分解酵素
。工作之進行係先抽 TG3的 DNA,經鑑識Sau3 A切割後粘接到用鑑識 BamHI切割
過質體 PHC79上,成為組合廣體,經細胞轉形作用送入 E. coli DH1菌種內,選殖含
有果膠分解酵素(pectate lyase) 基因者,進一步加以分析研究。
結果選殖到一個含果膠分解酵素的 clone,對植物亦會造成軟腐作用且相當穩定,分
析其酵素活性比 wild type TG3高,進一步分析完成其 restriation mapping跑電泳
知其分子量大小及跑 isoelectric focusing gel 知其酵素的等電點(PI)等等。
URI: http://hdl.handle.net/11455/20796
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