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標題: 枯草桿菌( Bacillus subtilis )F29-3 豐原素基因的研究
ANALYSIS OF THE GENES ENCODING THE BIOSYNTHESIS OF FENGYCIN IN BACILLUS SUBTILIS F29-3
作者: 陳奇良
Chen, Qi-Liang
關鍵字: BACILLUS-SUBTILIS;枯草桿菌;TRANSPOSON;HMOLOGOUSLY-REPLACEMENTAL-RECO;PLANT-SCIENCE;BOTANY;Bacillus subtilis;Fengycin;Antifungal antibiotic;Lipopeptide antibiotic;F29-3豐原素基因;轉位子;同源置換重組作用;抗氯黴素基因;PBR 322的DNA序列;植物科學;植物學;枯草桿菌;中豐原素;合成基因;枯草桿菌;豐原素;抗真菌之抗生素;脂胜呔抗生素
出版社: 植物學研究所
摘要: 
枯草桿菌 ( Bacillus subtilis )F29-3 能產生一種抗絲狀真菌的抗生素--fengymy-
cin (fengycin) 。 本論文是利用轉位子 (transposon)Tn917, 作為快速選殖fengy-
mycin合成基因的工具。
首先, 將帶有Tn917 的質體pTV1以原生質體轉形法送入枯草桿菌F29-3 中。並以紅黴
素誘使Tn917 發生轉位作用。篩選得十株不產生fengymycin的突變株。再將帶有pBR3
22-Tn917融合的線狀質體pTV20 轉形到已除去pTV1的四株突變株中, 並發生同源置換
重組作用 (homologously replacemental recombination),而將抗氯黴素基因及pBR3
22的DNA 序列由pTV20 置換到突變株的Tn917 中。篩選抗氯黴素的轉形株。
將轉形株 FEX11, FEX31, FEX51, 及FEX71 的染色體分別以ECORI(或SphI) 切割, 這
些片段再自身圈接 (self-ligation), 並轉形到 E. coli HB101中, 篩選抗安黴素 (
或抗安黴素加氯黴素) 的 E. coli HB101菌株。經DNA 雜交試驗 (DNA hybridizati-
on ), 證實, 送入 E. coli HB101中的轉移質體pBTE71, pBTS51, 及pBTS71均含有pB
R322的DNA 序列, Tn917 的右臂 (distal arm ), 及枯草桿菌F29-3 的染色體片段。
如此, 篩選得fengymycin的突變基因。
URI: http://hdl.handle.net/11455/21519
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