Please use this identifier to cite or link to this item: http://hdl.handle.net/11455/21626
標題: Stuidies on Molecular Cloning, Selection and sod Gene of ced and sod Gene in Corn (Zea mays L.)
玉米mefluidide誘導之基因與sod基因之選殖與基因表現之研究
作者: Yang, Miin-Jou
楊敏洲
關鍵字: chilling injury;寒害
出版社: 分子生物研究所
摘要: 
寒影響許多作物之生長與發育,輕微者可能造成作物生長不良、減少產
量 ,嚴重時甚至導致植株之死亡。mefluidide 是一種合成的植物生長
調節劑,且可保護低溫敏感作物免受寒害。本試驗乃利用 mefluidide 處
理後可增加玉米耐寒的特性 ,嘗試去選殖與分離 me fluidide處理所誘
導的基因,並分析所選殖基因的結構、組成,及與增加玉米耐寒性的關係
,同時調查 mefluidide 處理後超氧化歧化酵素 (SOD) 的表現。本試驗
以處理10 ppm mefluidide之玉米葉片的 polyA-RNA構築成cDNA library
。利用差異性篩選法自150,000個 cDNA clones 中獲得 3 個
mefluidide 所誘導的基因(pBMF7 、 pBMF16 及 pBMF34)。分析所構築之
片段大小分別是,pBMF7 為136 bp,pBMF16 為750bp,pBMF34為128bp。
在pBMF16上之片段有2 個 S acI 的切位。經過核酸序列比對的結果發現
pBMF34 與玉米葉綠體的 Gapc 基因有高達 92.7 ﹪的相似性,與玉米細
胞質液的Gapc1基因有86.4﹪ 的相似性,而pBMF7 目前仍未能發現與其他
植物的基因有相似性。調查這三個基因在mefluidide處理後不同時間之表
現,發現 pBMF7 及 pBMF16 會隨著處理時間的增加而增加,且在 24及
48 小時達最高點。pBMF34則在 8 - 12小時表現量最高而後遞減。比較三
個基因在mefluidide 處理 24小時及 mefluidide 處理12小時再處理
fluridone (ABA 合成抑制劑) 12 小時後表現,發現pBM F7及pBMF16之表
現均沒有差異,但pBMF34經fluridonej處理後其表現受抑制。本試驗以
PCR 的方式合成之 sod 基因片段為探針,篩選 sod 基因的 clones,初
步獲得24個 clones, 經PCR鑑定,發現有8 株呈正反應,目前並未對其
做核酸定序的工作。調查mefluidid e 處理後玉米葉片表現sod基因之情
形,結果顯示sod基因在mefluid ide 處理後8-12 小時其基因表現達到最
高點,之後便開始遞減。me fluidide處理 12 小時後再處理 fluridone
12 小時,sod 基因的表現並不會受到影響。
URI: http://hdl.handle.net/11455/21626
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