小白菜基因轉移之研究

Abstract

利用基因轉移技術將外來的DNA 送入植物體內，以改進作的的品質與增進其生產力， 已成為現代育種的一新理念。 本試驗即嘗試以GUS(β-glucuronidase) 基因為報導基因, 探討外來基因轉移到小白 菜之可行性, 期望對十字花科蔬菜之基因轉移建立一模式系統, 供將來轉移有利用價 值基因之參考。本試驗同時探討不同啟動子(promoter)對GUS 基因在轉殖小白菜之表 現。 本試驗以電孔法及電泳法，將GUS 基因導入小白菜體內。試驗結果，利用電孔法轉移 GUS 基因到小白菜葉肉細胞原生質體之系統，以500V/cm,960 μF 及1.5x10 /ml之原 生質體密度為最適當條件。本試驗同進證實，利用電泳法可有效的轉移GUS 基因到小 白菜胚；在轉殖小白菜之葉柄、葉脈經組織化學分析結果，有GUS 藍色反應；南方黑 點雜交法及檢驗轉殖後代族群的GUS 活性，顯示轉移的GuS 基因可并入小白菜染色體 基因組，表現、并有效的經種子遺傳到下一代。利用不同的啟動子其轉移效率，除了 以Adhl為啟動子者，其轉移率為60% 外，其它啟動子轉移率均在70-80%之間，同時得 知轉移效率高低為Rubisco ssu>CaMV 35S>Adhl ，而且利用不同啟動子對其組織專一 的表現有絕對的決定性。