Please use this identifier to cite or link to this item: http://hdl.handle.net/11455/51918
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dc.contributor.advisor王苑春zh_TW
dc.contributor.author林怡涵zh_TW
dc.contributor.authorLin, Yi-Hanen_US
dc.contributor.other中興大學zh_TW
dc.date2010zh_TW
dc.date.accessioned2014-06-06T08:55:10Z-
dc.date.available2014-06-06T08:55:10Z-
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/11455/51918-
dc.description.abstract在本研究室之先前研究中,由鳳仙花 (Impatiens balsamina L.) 分離之2-Methoxy-1,4-naphthoquinone (MeONQ),具高度抗幽門螺旋桿菌活性。感染幽門螺旋桿菌與胃癌有高度之關聯性,因此本研究接續先前研究,第一部分探討MeONQ對胃腺癌細胞之抑制作用及其機轉,第二部份探討對幽門螺旋桿菌誘發免疫反應之影響。 MeONQ對MKN45胃腺癌細胞呈劑量及時間依存型之抑制活性,50%抑制濃度為24.01 ± 0.38 μM。25~200 μM造成MKN45細胞停滯於S及G2/M期,低劑量 (25~50 μM) 造成輕/中度細胞凋亡。MeONQ具高度壞死MKN45細胞能力,25~200 μM處理劑量之細胞壞死比率為對照組之196~756%。50~200 μM處理造成粒線體跨膜電位明顯下降,為對照組之11~39%。25~200 μM處理致使MKN45細胞於6~10 h間產生高量超氧陰離子 (為對照組之168~336%)。50 μM劑量使MKN45細胞caspase-3蛋白質表現量下降;12.5~200 μM劑量使Bcl-2及Bax蛋白質表現量增加、12.5~50 μM劑量使細胞質之cytochrome c蛋白質表現增加,但使粒線體之cytochrome c蛋白質表現下降。MeONQ對MKN45細胞主要作用機轉為其於細胞內產生高量ROS,啟動Bcl-2路徑,生成更多ROS,產生氧化爆炸,造成細胞壞死;或經Bcl-2路徑,cytochrome c由粒線體釋出,活化caspase途徑造成細胞凋亡。 MeONQ對幽門螺旋桿菌誘發胃癌免疫反應之影響方面,MeONQ使感染幽門螺旋桿菌MKN45細胞之IL-8生成量增加 (為對照組之為302~418%)、ROS (過氧化氫及超氧陰離子含量分別為對照組之85~91%、52~67%) 生成量及COX-2表現量下降,IκBα蛋白質表現量增加。推測MeONQ對幽門螺旋桿菌誘發MKN45細胞免疫反應,係經由NF-κB路徑,影響IL-8、ROS及COX-2等發炎因子蛋白質表現及生成量。zh_TW
dc.description.tableofcontents目 次 中文摘要 i 英文摘要 ii 附表次/表次 vii 附圖次 viii 圖次 ix 縮寫表 x 壹、前言 1 貳、文獻整理 2 一、幽門螺旋桿菌之相關介紹 2 (一) 幽門螺旋桿菌簡介 2 (二) 幽門螺旋桿菌毒力因子 2 (三) 幽門螺旋桿菌與胃腸疾病之關係 8 (四) 感染幽門螺旋桿菌之免疫反應 8 二、細胞凋亡與壞死 14 (一) 細胞週期 14 (二) 細胞凋亡 15 (三) 細胞凋亡之調控因子 16 (四) 細胞壞死 18 三、2-Methoxy-1,4-naphthoquinone背景介紹 18 (一) 醌類化合物及其生理活性與毒性 18 (二) 2-Methoxy-1,4-naphthoquinone生理活性與毒性 21 (三) MeONQ活性機轉. 22 參、研究目的 24 肆、實驗架構 25 伍、材料與方法 26 第一部份: 2-Methoxy-1,4-naphthoquinone對人類胃腺癌細胞 凋亡及壞死作用 一、測試化合物 26 二、儀器. 26 三、細胞株及培養 .27 四、細胞毒性 time-course分析 .28 五、細胞週期分析 29 六、細胞核型態顯微鏡觀察 30 七、細胞凋亡/壞死分析 .30 八、活性氧物質含量分析 .31 九、粒線體跨膜電位分析 32 十、Caspase-3活性分析 .33 十一、西方墨點分析 .34 十二、統計分析 .36 第二部份:2-Methoxy-1,4-naphthoquinone對幽門螺旋桿菌 誘發胃癌之免疫反應 一、測試化合物. 37 二、儀器 37 三、細胞株及培養 37 四、幽門螺旋桿菌菌株及培養 39 五、細胞存活分析 40 六、西方墨點分析 40 七、反轉錄酶-聚合酶連鎖反應分析 42 八、細胞激素、活性氧物質及一氧化氮含量測定 45 九、統計分析 47 陸、結果與討論 48 第一部份: 2-Methoxy-1,4-naphthoquinone對人類胃腺癌細胞 凋亡及壞死作用 一、結果 (一) MeONQ對MKN45細胞存活之時間點分析 48 (二) MeONQ對MKN45胃腺癌細胞週期之影響 48 (三) MeONQ對MKN45胃腺癌細胞之細胞核型態影響 49 (四) YO-PRO-1/PI對MKN45胃腺癌細胞之雙染分析 .49 (五) MeONQ對MKN45胃腺癌細胞粒線體跨膜電位之影響 .49 (六) MeONQ對MKN45胃腺癌細胞生成活性氧物質之時間點分析 .50 (七) MeONQ對MKN45胃腺癌細胞caspase-3之活性與蛋白質表現之影響 .51 (八) MeONQ對MKN45胃腺癌細胞Bcl-2家族及cytochrome c蛋白質表現之影響 .51 二、討論 .51 第二部份:2-Methoxy-1,4-naphthoquinone對幽門螺旋桿菌 誘發胃癌之免疫反應 一、結果 (一) MeONQ對H. pylori ATCC 700824誘導MKN45細胞之IL-8表現 67 (二) MeONQ對H. pylori ATCC 700824誘導MKN45細胞活性氧物質生成量之影響 .67 (三) MeONQ對H. pylori ATCC 700824誘導MKN45細胞之COX-2表現 .67 (四) MeONQ對H. pylori ATCC 700824誘導MKN45細胞之IκBα表現 .68 (五) MeONQ對巨噬細胞RAW264.7之存活分析 .68 (六) MeONQ對H. pylori ATCC 700824誘導RAW 264.7巨噬細胞之一氧化氮表現 .68 二、討論 .69 柒、結論 77 捌、參考文獻 78 玖、附錄 (藥品配製) 97zh_TW
dc.language.isoen_USzh_TW
dc.publisher食品暨應用生物科技學系所zh_TW
dc.subject2-Methoxy-1en_US
dc.subject4-naphthoquinoneen_US
dc.subjectapoptosisen_US
dc.subjectnecrosisen_US
dc.subjectgastric adenocarcinoma cellen_US
dc.subjectHelicobacter pylorien_US
dc.subjectimmune responseen_US
dc.title2-甲氧基-1,4-萘醌對人類胃腺癌細胞之細胞毒性及對幽門螺旋桿菌誘發胃癌之免疫反應zh_TW
dc.titleCytotoxicity of 2-Methoxy-1,4-naphthoquinone against human gastric adenocarcinoma cells and its immune response to Helicobacter pylori-induced gastric canceren_US
dc.typeThesis and Dissertationzh_TW
item.fulltextno fulltext-
item.languageiso639-1en_US-
item.openairetypeThesis and Dissertation-
item.cerifentitytypePublications-
item.openairecristypehttp://purl.org/coar/resource_type/c_18cf-
item.grantfulltextnone-
Appears in Collections:食品暨應用生物科技學系
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