Please use this identifier to cite or link to this item: http://hdl.handle.net/11455/66334
標題: 以大腸桿菌表現抗菌蛋白PR-39及其功能分析
E. coli expression and functional study of antimicrobial peptide PR-39
作者: 陳怡儒
關鍵字: PR-39 抗菌蛋白
出版社: 獸醫微生物學研究所
摘要: 
PR-39為抗菌蛋白cathelicidin家族之一員,preproPR-39在豬的骨髓中合成,並經彈力蛋白酵素切割後成為有抗菌活性的PR-39。PR-39在免疫系統中具有多種功能,包括對嗜中性球具有化學趨化性,以及抑制超氧化物形成等等。本研究目的是利用大腸桿菌表現系統,表現perproPR-39之衍生抗菌蛋白,期能大量製備此抗菌蛋白,以應用於仔豬下痢症狀之改善。本研究使用反轉錄聚合酵素連鎖反應技術(RT-PCR),由仔豬之嗜中性球分別選殖出P31(prepro-region of PR-39)、preproPR-39、preproPR-26、PR-39及PR-26基因,再嵌入pET32a載體中,分別轉形至大腸桿菌之表現菌株中進行重組抗菌蛋白之表現,結果只有P31蛋白能大量表現,其他融合蛋白之表現量均不佳。將純化後之preproPR-39衍生蛋白經腸激酵素去除融合蛋白後,定量並進行抗菌活性試驗。結果顯示P31蛋白並無抑菌效果,而PR-26蛋白在1.9 mM時能有效抑制標準大腸桿菌菌株(E. coli, ATCC 25922)生長,PR-39蛋白則受限於低表現量與低回收率,而無法定出最低抗菌濃度,但結果顯示PR-26與PR-39蛋白都能使大腸桿菌菌株和金黃色葡萄球菌(S. aureus, ATCC 25923)生長遲緩。本研究證明確能利用大腸桿菌表現系統產製具有活性的抗菌蛋白,但如何提高蛋白產量和穩定性,則需要再進一步研究。
URI: http://hdl.handle.net/11455/66334
Appears in Collections:微生物暨公共衛生學研究所

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