Please use this identifier to cite or link to this item: http://hdl.handle.net/11455/94808
標題: 犬小病毒VP2蛋白及犬腺病毒Hexon蛋白之單株抗體製備及抗原決定位之分析
作者: 徐曉軍
Siao-Jyun Syu
關鍵字: 犬小病毒;犬腺病毒;單株抗體;抗原決定位
Project: Page
摘要: 
"犬小病毒(Canine Parvovirus, CPV)是不具封套之單股DNA 病毒,主要感染犬腸胃道;犬腺病毒 (Canine adenovirus, CAV)則屬於不具封套之雙股DNA病毒,會引起犬類傳染性肝炎。前人研究得知CPV之VP2蛋白及CAV之hexon蛋白具抗原性之表面蛋白。本研究主要研製檢測上述病毒蛋白之單株抗體。本研究已成功製備抗CPV之VP1-VP2∆N225及CAV之hexon之單株抗體。 已成功篩選出1株CPV VP1-VP2∆N225之單株抗體 (D11) 及4株抗CAV hexon (aa 34-348) 之單株抗體 (A8、A13、A14、A15)。將CPV之VP2 及CAV之hexon (aa 34-348) 基因缺損之方式經由聚合酶連鎖反應 (PCR) 進行擴增並建構於pET32a或pET21a表現載體中,再經由細菌表現出重組蛋白。將此CPV之VP2 及CAV之hexon (aa 34-348) 基因缺損之重組蛋白進行抗原決定位之定位,結果顯示CPV VP1-VP2∆N225單株抗體D11辦認CPV VP2 (aa 466-530);CAV hexon單株抗體A8辨認CAV hexon (aa 34-120);CAV hexon單株抗體A13可辨認CAV hexon (aa 202-208);CAV hexon單株抗體A14 可辨認CAV hexon (aa 206-274);而CAV hexon單株抗體A15則能辨認CAV hexon (aa 120-274)。以PierceTM Rapid ELISA Mouse mAb Isotyping Kit (Thermo)套組分析單株抗體免疫球蛋白亞型,結果顯示辨認CPV VP1-VP2∆N225之單株抗體及CAV hexon (aa 34-348) 之四株單株抗體皆為免疫球蛋白IgG1。再以protein G純化單株抗體,結果證實此一株抗CPV VP2之單株抗體及兩株抗CAV hexon (34-348) 之單株抗體具高特異性及高敏感度。因此這三株單株抗體具有高度潛力可應用於研發immunochromatography test (ICT) strips用於快速檢測犬隻病原。
"
URI: http://hdl.handle.net/11455/94808
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